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通常情況下，細胞在體外培養環境中大多呈現扁平、多角形或圓形等形態，這些細胞形態對于細胞的營養吸收、分裂增殖及物質轉運等生理活動至關重要。然而，不少研究者在實際培養過程中會遇到細胞形態異常的問題，尤其是細胞出現“拉絲"現象。這一現象，往往伴隨細胞狀態變差，對實驗結果的準確性及實驗進展構成了不容忽視的影響。
本期細胞學堂，我們將為您詳細介紹細胞培養過程中出現拉絲現象可能的原因，并針對性提供解決方法，助您細胞培養無憂！
某些細胞株在正常培養過程中，如SH-SY5Y（人神經母細胞瘤細胞）和K7M2 wt（小鼠骨肉瘤成骨細胞），通過光學顯微鏡觀察（如圖1和2所示），細胞本身形態就有拉絲和觸角狀形態，是其正常形態。
圖1. SH-SY5Y細胞形態
圖2. K7M2 wt細胞形態
解決方法：
在初次培養不熟悉的細胞過程中，若觀察到拉絲現象，首先建議參考權-威細胞庫提供的細胞圖片，以鑒別該細胞本身是否具有拉絲的形態特征。對于本身形態就存在拉絲特征的這類細胞，無需針對拉絲現象進行特殊處理。然而，如果經過對比明確細胞本身不具有拉絲的形態特征，且伴隨有細胞增殖變慢或其他改變時，那么就需要進一步排查可能的原因。
細胞接種密度過高時，細胞之間的營養和空間競爭會加劇，這種競爭壓力可能導致細胞形態拉絲。若使用無血清培養基培養間充質干細胞，接種密度過低，也可能導致細胞長不起來，細胞形態會逐漸伸長拉絲。
解決方法：
根據細胞的特性，選擇合適的接種密度，并定期進行細胞傳代，將細胞密度維持在合適范圍內。
如培養基配方錯誤、培養基中關鍵營養物質（如氨基酸、維生素、生長因子等）不足、pH值變化、溫度波動或氣體環境（如CO?濃度）不適宜，均可能影響細胞正常形態與功能，導致細胞拉絲。
解決方法：
使用新鮮配制的培養基培養細胞；根據細胞的生長情況，及時換液，確保培養過程中營養充足；必要時可嘗試提高血清使用濃度（終濃度不超過20%）或更換高品質胎牛血清（如圖3所示）。
圖3. Renca（小鼠腎癌細胞）細胞形態
在處理如貼壁細胞等需要消化的細胞時，解離試劑的選擇、消化時間的控制、操作力度的把握等都至關重要。解離試劑選擇不當、消化時間過長或操作力度過大等均可能導致細胞受損，進而引發細胞形態改變，出現拉絲現象。
解決方法：
針對不同細胞選擇合適的解離試劑，控制消化時間，在消化過程中操作輕柔，最-大程度降低消化過程對細胞的損傷。
在細胞培養的過程中，若出現細菌、真菌、支原體、黑膠蟲等污染，其與細胞爭奪營養，同時產生有細胞毒性的代謝產物，將會導致細胞狀態明顯變差，細胞可能出現拉絲現象。
解決方法：
提高細胞培養過程中的無菌操作意識，使用無菌試劑、耗材。對于支原體、黑膠蟲等不易察覺的污染，可以定期檢測或空培確定是否發生污染。及時發現，及時處理，有效防止污染范圍的擴大。
以上就是關于細胞拉絲原因及解決方法的詳細解讀，更多細胞培養干貨，請持續關注細胞學堂專欄~
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