在細胞體外培養工作中，為了達到長期保存細胞的生物活性的目的，須將細胞進行冷凍保存，并在實驗需要的時候將其重新復蘇和培養。目前，細胞凍存最-常用的技術是液氮冷凍保存法，主要采用添加適量保護劑使細胞緩慢降溫至指定溫度范圍，從而到達保護細胞的目的。

普諾賽即用型無血清非程序凍存液是普諾賽技術團隊在長期的細胞研究過程中針對細胞的凍存和復蘇不斷優化實驗條件，面向數百種細胞研發出的專用凍存液產品。 

無血清非程序凍存液添加了細胞沉降穩定劑，可延緩細胞在凍存過程中的沉降速率，防止細胞互相擠壓，影響細胞凍存效果。另外，添加了細胞膜保護劑、滲透性細胞膜內保護劑、非滲透性細胞保護劑等多種冷凍保護劑，這些成分在溶液中同水分子結合，發生水合作用，弱化水的結晶過程使溶液的粘性增加從而減少冰晶的形成，能大大降低細胞在凍存過程中冰晶對于細胞的損傷，有效提高細胞復蘇存活率。該產品配方成分明確，不含血清、不含動物源性蛋白，可減少各類細菌、病毒和支原體等污染，保證凍存細胞的安全；不僅適用于常規細胞系、原代細胞，同時亦適合于無血清培養細胞和蛋白表達細胞。 

與傳統凍存液相比，無需繁瑣費時的程序凍存步驟或價格高昂的程序降溫儀，可直接重懸細胞后置于-80℃超低溫冰箱，長期冷凍保存。如果想液氮中長期保存，需先放入-80℃超低溫冰箱至少一天時間，方可移至液氮罐中保存。

無血清非程序凍存液產品特點

1、即用型細胞凍存液，隨用隨取，2-8℃穩定保存1年以上；

2、無需繁瑣的程序凍存步驟或昂貴的程序降溫儀，直接放入-80℃冰箱，節省大量的時間和精力；

3、細胞復蘇率高達90%以上，適用于大多數哺乳動物細胞的凍存；

4、不含血清，批次間差異小；

5、能夠有效維持干細胞的多向分化潛能；

6、化學成分明確，沒有添加任何外源蛋白，減少細胞污染機會，同時減少外源蛋白對細胞正常生長和分化的影響。

無血清非程序凍存液使用說明

(一)細胞凍存

1、選擇對數生長期的細胞（90%左右），并保證在凍存前24 h內換液一次，收集細胞，并將細胞制備成單細胞懸液（貼壁細胞可能需要用胰酶消化），計數；

2、將細胞懸液1000 r/min 離心5 min，棄上清；

3、向細胞沉淀物中加入細胞凍存液，輕輕吹打，重懸細胞，使細胞密度達到5×10?-1×10?個/mL；

4、將上述細胞懸液按0.5 mL或1.0 mL的量，分裝于無菌細胞凍存管內，擰緊管蓋，并做好標記；

5、直接將分裝好的細胞凍存管直接置于-80℃超低溫冰箱中，可長期冷凍保存。

6、如果想液氮中長期保存，需先放入-80℃超低溫冰箱至少一天時間，方可移至液氮罐中保存。

(二)細胞復蘇

1、從液氮罐中取出凍存的細胞，立即放入37℃水浴鍋中快速解凍(操作時切勿使水浸沒凍存管口，以免造成細胞污染)；

2、待細胞凍存管中凍存液完-全融化后，立即逐滴加入少量細胞完-全培養基于該冷凍管中與細胞進行混合，再將細胞混合液從凍存管中移入含有8-10 mL該細胞完-全培養基的試管中，輕輕混合均勻；1000 r/min離心5 min，棄上清；

3、加入1-2 mL完-全培養基重懸細胞，按照合適的接種密度將細胞接種到細胞培養容器中，加入適量的已預熱的新鮮的細胞完-全培養基；

4、輕輕搖晃培養器皿，使細胞分布均勻，靜置于37℃、飽和濕度細胞培養箱中培養。

無血清非程序凍存液穩定性及保存條件

1、置于2-8℃避光保存，有效期為1年；

2、本產品請于保質期內使用，超過保質期，必須放棄使用；

3、為確保產品質量，請避免反復凍融相關產品。

無血清非程序凍存液注意事項

1、凍存細胞分裝至凍存管后，應減少在室溫/4℃存放時間，盡快移入到-80℃超低溫冰箱；

2、對于原代胚胎干細胞/iPS細胞/其它珍貴細胞樣本等凍存時，我們建議您在使用前，事先對所凍存的細胞進行至少為期1周的細胞凍存測試實驗，確認沒問題后再進行正式凍存；

3、本產品經3次0.22 μm過濾除菌，使用本產品時應注意無菌操作，避免污染；

4、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作；

5、本產品僅用于科研用途，不可用于診斷、治療、臨床及其他用途。

無血清非程序凍存液文獻列表

• Aβ1-42 promotes microglial activation and apoptosis in the progression of AD by binding to TLR4 (2024-11-14)

  期刊：Redox Biology

  DOI：10.1016/j.redox.2024.103428

  影響因子 ：10.7

  引用產品： 通用血清型程序凍存液 ,  BV2 (DMEM) 細胞

• Impact of manufacturing processes on glycerolipid and polar lipid composition and ultrastructure in infant formula (2024-02-01)

  期刊：FOOD CHEMISTRY

  DOI：10.1016/j.foodchem.2024.138623

  影響因子 ：8.5

  引用產品： 無血清非程序凍存液